导语:细胞系,是指原代细胞经首次传代成功后、能持续增殖的细胞群体。它们分类多样、功能全面,是实验室中最标准化、可重复的生命单元,也成为我们探索疾病机制、筛选药物、解析基因功能的核心体外模型。
让合适的细胞,在合适的模型中,回答合适的科学问题—这是体外研究的基本逻辑。那么,如何为你手中的科学问题,挑选最匹配的细胞“拍档”,从而构建一个坚实的“开端”呢?

细胞系分类图示
明确研究目的从科学问题倒推需求
实验研究方向和目的是选择细胞系最根本的出发点。
1.疾病机制研究:
应选择最能代表该生理/病理过程的细胞。
肿瘤研究:使用对应组织来源的肿瘤细胞系(如研究肝癌可选HepG2、三阴性乳腺癌可选MDA-MB-231、肺癌选A549等)。
遗传病研究:用“患者来源诱导多能干细胞(iPSC)分化成的靶组织细胞”:基因背景自带突变、可无限扩增、能定向分化为疾病相关组织。
感染性疾病: 选择病原体的天然宿主细胞或易感细胞系(如研究新冠病毒常用Vero E6或ACE2过表达的HEK293T)。
2.药物开发
靶点验证: 可选择易于易于转染、高增殖率的通用工程细胞系(如HEK293),进行基因过表达或敲除。
药效与毒性评估: 必须使用疾病相关细胞系或原代细胞(更能反映体内反应),并考虑代谢活性(如肝毒性评估常用HepG2肝细胞)。
3.基础细胞生物学过程研究:
如巨噬细胞的功能性研究常用小鼠源的RAW 264.7细胞和人源的THP-1细胞(经PMA诱导分化后)。
了解“拍档”即细胞系本身的关键属性
在研究目标范围内,进一步比较候选细胞的“简历”。
种属与组织来源: 人源>鼠源(临床相关性);细胞类型(上皮、内皮、成纤维、神经)需与目标组织或器官匹配。
遗传与表型背景:是否携带与研究目的相关的特定基因突变、蛋白表达或信号通路活性?长期传代是否会出现代次漂移而影响表型特征?务必查阅相关文献确认,并使用低传代数的冻存细胞开始实验。
背景清晰度与认证:STR鉴定是细胞系的身份证,明确身份避免存在交叉污染;支原体PCR阴性报告是细胞系通行码,确保实验稳定进行。
细胞生长特性:贴壁or悬浮?培养时有无CO2需求?明确相关信息,核查工作平台,以确定实验的可操作性。

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贴壁细胞-Hep G2 |

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悬浮细胞-Raji |
实验“避坑”指南
选择“正确的细胞”只是研究的第一步,规范使用和维护亦是实验的关键。
维持细胞状态的稳定性:严格按照说明书培养条件培养细胞,切忌擅自更改,防止因生活环境更改让你的“拍档”水土不服,无法好好工作。
严控传代次数:拿到细胞后,尽量在传代5次内留好冻存种子。复苏细胞后尽量将实验控制在低传代次数内完成,避免长期传代引发遗传的漂变而干扰实验结果。
结语:没有“最好”的细胞系,只有“最合适”的细胞系。一个可靠的研究开端,建立在对实验目的的深刻洞察与细胞模型特性的精准匹配之上。
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